Amostras Sanger

E

Amostra Alternativa: Saliva obtida com kit especial para pacientes com deficiências de saúde mental ou que tenham dificuldade em acessar o laboratório. Kits para coleta de saliva contêm liquido estabilizante que preserva o DNA inibindo sua degradação e prevenindo a contaminação bacteriana. Entretanto é importante não  comer, beber, fumar ou mastigar chiclete durante 30 minutos antes de coletar a amostra de saliva. Há kits especiais para crianças e um deles recomendado é ORAcollect Pediátrico OC-175 (DNA Genotek). Estes coletores tem uma extremidade com esponja que não deve ser tocado e igualmente ser evitado de entrar em contato com qualquer superfície. A amostra de DNA é obtida introduzindo  a esponja tão atrás na boca quanto possível, esfregando por 10 vezes  ao longo das gengivas inferiores em movimentos para frente e para trás. Evite ao máximo esfregar os dentes para evitar excessiva contaminação de bactérias. A criança não deve comer, beber ou mascar chiclete por 30 minutos antes de coletar a amostra oral.

Container Recomendado: Sangue total: vacutainer K2 EDTA (K2E) 7,2 mg, tampa violeta 4,0 ml; para  obtenção de amostra de saliva há necessidade de kit especial aprovado pelo laboratório (ex. Oragene DNA OG-500 ou ORAcollect Pediátrico OC-175).

Temperatura de Transporte: Sangue deve ser enviado resfriado  a 3^o – 8^o C com gelo químico reciclável e nunca congelado. Saliva  é enviada na temperatura ambiente. A amostra de saliva pode ser enviada usando o sistema postal padrão.

Estabilidade da Amostra: Amostras de sangue são estáveis até 72 horas desde que a temperatura seja preservada nos níveis entre 3^o a 8^o C. Saliva é estável por meses se for coletado com kit especiais.

Rejeição: Sangue coagulado, congelado ou recebido após 72 horas após sua obtenção. Restrições em relação a extração de DNA da amostra de saliva incluem volume de saliva coletada, contaminante da saliva com bebidas, alimentos nicotina etc. Não envie amostras que cheguem de 6^a feira a domingo em São Paulo.

Metodologia: Sequenciamento Completo Bidirecional Sanger.