INFORMAÇÕES GERAIS
NOME DO EXAME
Doença de Lyme (Borrelia Burgdorferi)
OUTROS NOMES DO EXAME
Borreliose de Lyme; Borreliose; Síndrome de Bannwarth;
UTILIDADE DO EXAME
Pesquisa de Borrelia em fluido de articulação
NECESSIDADE DE PEDIDO MÉDICO
Não há necessidade de pedido médico.
COBERTURA OPERADORA PLANO DE SAÚDE
Não há cobertura dos planos de saúde.
PREPARAÇÃO DA PACIENTE
Não preparação.
AMOSTRA
Testes de PCR são recomendados apenas em casos especiais, por exemplo, diagnóstico de artrite de Lyme, porque é uma forma altamente sensível de detectar DNA no líquido sinovial.
Amostra de sangue – mesmo quando realizada corretamente, a PCR frequentemente mostra resultados falso-negativos porque poucas células de Borrelia podem ser encontradas no sangue (e no líquido cefalorraquidiano) durante a infecção.
ESTABILIDADE DA AMOSTRA
Refrigerada: 2º a 8ºC até 72 horas
Aliquotagem de amostras para exames moleculares
Alíquota refere-se a uma parte ou porção representativa de uma amostra maior, que é separada para ser utilizada em um outro experimento.
Para que nenhuma informação seja perdida nesse processo, o laboratório deve manter um controle de aliquotagem e em um primeiro momento, o técnico identifica o microtubo que receberá a alíquota e ao mesmo tempo registra junto ao sistema. A aliquotagem deve ser feita por um técnico de laboratório familiarizado com os objetivos da alíquota e os resultados esperados.
O exemplo de aliquotagem será do líquido de Citologia de Base Líquida (CBL). A CBL, também conhecida como citologia oncótica em meio líquido ou citologia em meio líquido, é uma técnica que em vez de as células serem raspadas diretamente na lâmina, como na citologia tradicional, elas são coletadas e suspensas em um líquido preservante, o que facilita a detecção de possíveis lesões. O líquido preservante tem na sua composição o metanol que é toxico para pele, olhos e fígado, então o uso de luvas torna-se imprescindível nesta etapa.
O líquido da CBL pode conter um número variável células livres, debris celulares, células inflamatórias, hemácias, bactérias, vírus, fungos, protozoários, DNA livre, espermatozoides, fibrina, traços de cremes ou outras substâncias usada anteriormente para lavagem vaginal, e muito mais. Tudo isso vem parcialmente livre no líquido preservante ou sedimentado do fundo do frasco. O exame de Patologia Molecular visa extrair todo DNA/RNA contido na amostra. O técnico deve homogeneizar a amostra para tudo ser representado submetendo a amostra a forte agitação motora. Em seguida transferir 1,5 ml desse líquido usando uma pipeta de Pasteur para o microtubo e descartá-la. Usar um microtubo com tampa de rosca (Kasvi é recomendado) e nunca a um microtubo de fechamento por pressão, pois este pode abrir espontaneamente no translado ao laboratório. Lembre-se, se aliquotar mais que o necessário (CBL originalmente com 18 ml de preservante), pode-se interferir no processamento automático da citologia por pouco líquido. Nestes casos o técnico deverá repor a volumetria com líquido preservante ou mesmo álcool 70% na falta do primeiro.
DESCRIÇÃO DA METODOLOGIA
Detecção baseado em Tecnologia do PCR em tempo real (RT-PCR). Os ensaios moleculares, que dependem da detecção de ácidos nucleicos virais, fornecem resultados rápidos com alta sensibilidade e especificidade, tornando-os testes ideais quando usados no contexto de uma avaliação clínica cuidadosa. Testes de reação em cadeia da polimerase (PCR) para doença de Lyme também foram desenvolvidos para detectar o material genético (DNA) da espiroqueta da doença de Lyme.
PRAZO
Prazo de processamento de amostras é de 3 a 5 dias após recebimento no laboratório
INFORMAÇÃO CLÍNICA
A doença de Lyme é causada por picada de carrapato infectado com a bactéria Borrelia burgdorferi. O sinal mais comum de infecção é uma erupção cutânea vermelha em expansão, conhecida como eritema migratório, que aparece no local da picada do carrapato cerca de uma semana depois. A erupção cutânea geralmente não causa coceira nem dor. O diagnóstico precoce pode ser difícil. Outros sintomas iniciais podem incluir febre, dores de cabeça e cansaço.
Testes de reação em cadeia da polimerase (PCR) para doença de Lyme também foram desenvolvidos para detectar o material genético (DNA) da espiroqueta da doença de Lyme. Cultura ou PCR são os meios atuais para detectar a presença do organismo. A PCR tem a vantagem de ser muito mais rápida no entanto, os testes de PCR são suscetíveis a resultados falso-positivos, por exemplo, pela detecção de restos de células mortas de Borrelia ou contaminação de espécimes. O exame é reservado para amostras especiais como líquido sinovial.
VALORES DE REFERÊNCIA
Interpretação do Exame
1. Resultado “Detectado” indica a presença do patógeno na amostra.
2. Resultado “Não Detectado” indica a ausência do patógeno ou concentração inferior ao limite de detecção (LoD) do teste.
3. Resultado “Inconclusivo”: Sem amplificação do controle interno.
Genoa e Encodexa são duas marcas LPCM