Catálogo de Testes

NOME DO EXAME

INFECÇÃO RESPIRATÓRIA POR BOCAVÍRUS

OUTROS NOMES DO EXAME

HBoV; Bocavírus Humano 1; HBoV1;

UTILIDADE DO EXAME

Pesquisa de patógeno respiratório usados para ajudar a diagnosticar a causa da infecção respiratória. Usados principalmente para pacientes fortemente comprometidos com infecção respiratória, ou gravemente doentes, ou hospitalizadas e/ou com risco aumentado de uma infecção evoluir com complicações ou coinfecções

NECESSIDADE DE PEDIDO MÉDICO

Não há necessidade de pedido médico.

COBERTURA OPERADORA PLANO DE SAÚDE

Não há cobertura dos planos de saúde.

PREPARAÇÃO DA PACIENTE

Não preparação.

AMOSTRA

Obtenção de amostras Swab Nasal ou Escarro. Exame exclusivamente para pacientes com sintomatologia.

ESTABILIDADE DA AMOSTRA

Refrigerada: 2º a 8ºC até 72 horas

Aliquotagem de amostras para exames moleculares

Alíquota refere-se a uma parte ou porção representativa de uma amostra maior, que é separada para ser utilizada em outro experimento.

Para que nenhuma informação seja perdida nesse processo, o laboratório deve manter um controle de alíquotas e, em um primeiro momento, o técnico identifica o microtubo que receberá a alíquota e, ao mesmo tempo, a registra no sistema. A alíquota deve ser realizada por um técnico de laboratório familiarizado com os objetivos e os resultados esperados.

O exemplo de aliquotagem será do líquido de Citologia de Base Líquida (CBL). A CBL, também conhecida como citologia oncótica em meio líquido ou citologia em meio líquido, é uma técnica onde, ao invés de raspagens na lâmina, as células são coletadas e suspensas em um líquido preservante com metanol, que é tóxico, requerendo uso de luvas.

O líquido da CBL pode conter células livres, debris, células inflamatórias, hemácias, bactérias, vírus, fungos, protozoários, DNA livre, espermatozoides, fibrina, resíduos de cremes, outras substâncias usadas na lavagem vaginal, e mais. Essas partículas estão parcialmente livres no líquido ou sedimentadas no fundo, e o exame de Patologia Molecular busca extrair todo o DNA e RNA presentes na amostra.

O técnico deve homogeneizar a amostra para que tudo seja representado, submetendo-a a forte agitação motora. Em seguida, transferir 1,5 ml desse líquido usando uma pipeta de Pasteur para o microtubo e descartá-lo. Usar um microtubo com tampa de rosca (Kasvi é recomendado) e nunca um microtubo de fechamento por pressão, pois este pode abrir espontaneamente no traslado ao laboratório. Lembre-se: se aliquotar mais do que o necessário (CBL originalmente contém 18 ml de preservante), pode-se interferir no processamento automático da citologia por pouco líquido. Nestes casos, o técnico deverá repor o volume com líquido preservante ou, na falta deste, com álcool 70%.

Medidas para aliquotagem abaixo. Dica: se enviar ≥ 4 ml, utilize um tubo Falcon (ou similar) de 15 ml, como na figura ao lado.PCR para HPV – 2 ml
PCR para Painel Ginecológico – 2 ml
PCR para HPV e Painel Ginecológico – 2 ml
Captura Hibrida HPV – 4 ml
Captura para HPV + PCR para HPV – 6 ml
Captura para HPV + PCR para painel ginecológico – 6 ml
Captura para HPV + PCR para HPV e painel ginecológico – 6 ml.

DESCRIÇÃO DA METODOLOGIA

Detecção baseado em Tecnologia do PCR em tempo real (RT-PCR). Os ensaios moleculares multiplex, que dependem da detecção de ácidos nucleicos virais, fornecem resultados rápidos com alta sensibilidade e especificidade, tornando-os testes ideais quando usados no contexto de uma avaliação clínica cuidadosa, mas sua pronta disponibilidade .

PRAZO

A amostra para exame pode ser coletado no domicílio sem qualquer custo adicional. Os prazos para entrega de resultados obedecem aos seguintes critérios: Amostras coletadas no domicílio (preferível) das 7 às 12 horas terão laudos emitidos até as 18 horas do mesmo dia. Amostras coletadas no domicílio entre 13 e 24 horas terão laudos emitidos até as 7 h do dia seguinte.

INFORMAÇÃO CLÍNICA 

O DNA do Bocavírus humano 1 (HBoV1) é frequentemente detectado nas vias aéreas superiores de crianças pequenas com sintomas respiratórios. Devido à sua persistência e codetecção frequente com outros vírus, no entanto, seu papel etiológico permanece controverso. O Bocavírus humano 1 (HBoV1), um novo membro do gênero Bocavírus da família Parvoviridae, foi descoberto em 2005 por sequenciamento em larga escala em amostras nasofaríngeas de crianças. O DNA do HBoV1 tem sido frequentemente detectado por PCR nas vias aéreas superiores de crianças pequenas que têm doenças do trato respiratório superior ou inferior e, com menos frequência, em suas fezes. Além disso, 3 outros Bocavírus, HBoV2, 3 e 4, foram detectados recentemente em fezes humanas, e o HBoV2 tem sido associado à gastroenterite aguda.

O HBoV1 nas vias aéreas superiores também ocorre persistentemente ou recorrentemente em crianças assintomáticas. Devido a essas características e à codetecção frequente com outros vírus, o papel do HBoV1 na doença respiratória tem sido questionado. Contornar os problemas relacionados à PCR de positividade prolongada ou recorrente e revelar a associação da infecção por HBoV1 com a doença requer um diagnóstico mais confiável que use soro para PCR e detecção de anticorpos.

RESULTADO E INTERPRETAÇÃO

Os vírus e respectivas regiões-alvos de seus genomas estão descritos na primeira e segunda colunas, respectivamente. Os limites de detecção apresentados na terceira coluna foram estimados através da diluição seriada dos genomas virais, sendo consideradas os menores números de cópias para os quais 100% das reações foram positivas. As porcentagens de concordâncias dos resultados positivos e negativos obtidos com nosso protocolo e outros protocolos comerciais estão apresentados na quarta e na quinta colunas, respectivamente.

Tabela 1. Protocolo de detecção dos vírus respiratórios.

Observações: Resultados obtidos na comparação com o ensaio FTD Respiratory pathogens 21 kit – Fast Track Diagnosis (Siemens);

VALORES DE REFERÊNCIA

Interpretação do Exame

1. Resultado “Detectado” indica a presença do patógeno na amostra.
2. Resultado “Não Detectado” indica a ausência do patógeno ou concentração inferior ao limite de detecção (LoD) do teste.
3. Resultado “Inconclusivo”: Sem amplificação do controle interno.

Nem todos os resultados positivos indicam infecção ativa atual. Episódios assintomáticos são especialmente comuns em alguns vírus (exemplo Bocavírus e Rinovírus), então um julgamento clínico também deve ser feito sobre se o vírus detectado está causando os sintomas do paciente ou se os sintomas estão ocorrendo incidentalmente durante um período de detecção viral assintomática.

PRECAUÇÕES

Nem todos os resultados positivos indicam infecção ativa atual. Episódios assintomáticos são especialmente comuns em alguns vírus (exemplo Bocavírus e Rinovírus), então um julgamento clínico também deve ser feito sobre se o vírus detectado está causando os sintomas do paciente ou se os sintomas estão ocorrendo incidentalmente durante um período de detecção viral assintomática.

OBSERVAÇÕES

Este exame será feito dentro dos painéis de Doenças Virais respiratória (Painel Doenças Virais Respiratórias, 18 vírus [cód. 12433] ou Painel de Doenças Virais Respiratórias, 4 vírus [cód. 12435]) por PCR tempo real, multiplex. A pesquisa de vírus respiratório individualmente é processado se houver necessidade de testes específicos de alta demanda em situações especiais como epidemias, problemas públicos de saúde, e outros.